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北京禾谱利拓科技有限公司宣布向受到地震影响的积石山地区捐赠物资,希望助力灾区重建工作,帮助震区受灾群众渡过难关。
目的:探讨酵母抽提物(yeastextract,YE)FM888对CHO细胞生长的影响。 方法:以CHO悬浮细胞为研究对象,在培养基中分别添加1、2、3、5g/L的FM888,进行摇瓶批式培养,台盼蓝拒染法和细胞计数仪测定活细胞密度和细胞活率。用添加1、2g/LFM888的培养基培养CHO细胞,生化分析仪检测细胞的生化代谢(葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺、谷氨酸和铵根离子的含量)情况;流式细胞术检测细胞的周期分布及凋亡情况。 结果:培养基中加入1、2g/L的FM888可促进CHO细胞生长,确保培养过程中维持较高活细胞密度和细胞活率;CHO细胞培养前期,葡萄糖、乳酸和铵根离子在培养体系中的浓度均高于空白对照组(未添加FM888),谷氨酰胺低于空白对照组,能够促进细胞代谢活动,培养后期逐渐下降;可减少细胞损伤及CHO细胞酶的释放;可增加CHO细胞S期的比例,促进细胞增殖;可降低CHO细胞凋亡率。
背景知识 合成生物学一直以来都是生命科学领域的一个重要分支,它通过重新设计和构建生物系统的基因组来创建新的生物功能。虽然合成生物学在实验室研究中取得了显著的进展,但要将这些理念和技术应用于产业化生产,仍然面临着一系列挑战。早在合成生物学发展的第一个十年,Nature 就曾刊文指出合成生物学发展面临的五大挑战,时至今日,这些挑战仍是企业面临的研发难点。首先,仍存在大量生物元件未被清晰表征,即使进行过测试,元件性能也会因不同细胞类型、不同实验条件而改变。第二,细胞内代谢通路难以预测性设计,即使每个生物元件的功能已知,但当多个元件组合起来,仍有可能无法如预期般工作。第三,细胞内代谢系统复杂性难以处理,随着代谢通路系统越来越大,构建和检测它们的过程愈发复杂; 揭示参与反应路径的基因、开发或改善元件以控制基因表达的工作量巨大。第四,存在很多不相容的元件,一旦合成的基因回路被构建并放入细胞,其可能对宿主细胞产生预期之外的影响。第五,细胞内的分子活动容易受到随机波动、噪声影响,生长条件的变异、随机出现的基因突变都将影响细胞表现,导致“细胞工厂”的鲁棒性差。